摘 要：荧光试剂水杨醛缩邻氨基苯酚在六亚甲基四氨盐酸缓冲溶液介质中，能与锌离子形成稳定络合物使其荧光强度增强且荧光增强的程度与锌质量浓度成正比，据此建立了测定痕量锌离子的直接荧光分析方法。研究了试剂与锌的荧光反应的最佳测定条件，讨论了共存离子的影响。在λex/em=405/517nm处，锌量在0.7-158.0 μg/L范围内呈良好的线性关系。平行测定Zn2+（100ug/L）标准溶液11次，RSD为1.98％，方法检出限为0.23ug/L。该方法重复性好、灵敏度高，简便、快速，试剂合成方法简单。可用于水样中锌的测定，回收率为101％-102%。 
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　　关键词：合成 荧光增强 锌 水杨醛缩邻氨基苯酚 
　　锌元素是人体所必需的微量元素，缺乏锌元素会引起人体一系列的机能紊乱，一些组织器官，生理功能障碍，甚至还有可能发生病理改变和疾病。目前，微量锌的测定常用原子吸收光谱法、吸光光度法、伏安法等[1-6]。荧光法作为分析金属离子的手段近来多用一些席夫碱类[7，8]和腙类[9-10]化合物作为荧光试剂， 诸种方法或需要价格昂贵的仪器、或合成方法复杂、操作繁琐或选择性和灵敏度有很大的局限性。本文用水杨醛缩邻氨基苯酚作为荧光试剂，在pH 5.44的六亚甲基四氨盐酸缓冲溶液介质中锌离子能使其荧光强度增强，据此建立了直接荧光法测定锌离子的方法。该方法重现性好，简便、快速，试剂合成方法简单、灵敏度高。用于水样中锌的测定，结果满意。 
　　一、实验部分 
　　1.主要仪器和试剂 
　　仪器： LS-30荧光光度计；970CRT荧光分光光度计； pHS-PL酸度计；HH-4数显恒温水浴锅；BS210S电子分析天平 。 
　　试剂：锌离子标准储备溶液：100mg/L，用时稀释为2.0 mg/L的工作液；水杨醛缩邻氨基苯酚（H2L）溶液：1.0×10-4 mol/L，称取适量水杨醛缩邻氨基苯酚（自制），加入一定量无水乙醇溶解，然后用水定容；六亚甲基四胺—盐酸（CH2）6N4-HCl缓冲溶液：pH5.44。实验所用试剂均为分析纯，水为二次蒸馏水。 
　　2.实验方法 
　　在2支10mL具塞比色管中，分别加入水杨醛缩邻氨基苯酚2.5 mL，六亚甲基四氨盐酸缓冲溶液1.0mL，其中一支加入适量2.0 mg/L锌离子工作液，另一支为试剂空白，稀释至刻度，摇匀后在55℃的恒温水浴锅中静置15 min，流水冷却终止反应。使用1cm荧光池，在λex/λem=405/517 nm处分别测量溶液的荧光强度，计算出二者的相对荧光强度差值△F。 
　　二、结果讨论 
　　1.激发光谱与发射光谱 
　　水杨醛缩邻氨基苯酚在酸性介质中能发出强烈的紫色荧光。由图1可知，体系的最大激发波长为405 nm，发射波长为517 nm。而且当体系中加入锌离子后，最大激发和发射波长没有发生位移，但峰值荧光强度有明显增强。 
　　2.实验条件的选择 
　　2.1反应介质及pH值的影响 
　　水杨醛缩邻氨基苯酚在乙醇水溶液中荧光强度相对较低，然而在不同的介质中其荧光强度都有所增强。按照实验方法，在相同条件下分别考察了柠檬酸-柠檬酸钠缓冲溶液、磷酸氢二钠-柠檬酸缓冲溶液、磷酸二氢钠-氢氧化钠缓冲溶液、NH4Cl－NH3？H2O缓冲溶液和（CH2）6N4-HCL缓冲溶液。发现用（CH2）6N4-HCL缓冲溶液时体系荧光强度最强且锌离子的增强作用相对更加明显。因此用（CH2）6N4-HCL缓冲溶液并考察了pH值对应光强度的影响，结果表明pH =5.44时效果最佳。 
　　2.2水杨醛缩邻氨基苯酚的用量 
　　按照实验方法，研究了水杨醛缩邻氨基苯酚浓度在5.0×10-6～5.0×10-5mol/L之间对体系△F的影响。发现试剂浓度为2.5×10-5mol/L时荧光强度最高，即加入2.5 mL。 
　　2.3缓冲溶液用量 
　　缓冲溶液的用量对体系的荧光强度影响很大，按实验方法，在其它条件不变的情况下，改变六亚甲基四氨盐酸缓冲溶液的用量，对荧光强度的变化进行了考察。结果发现刚开始随着缓冲溶液用量的逐渐增加，空白溶液和试样溶液的荧光强度都有所增强，而荧光强度变化量△F则随着缓冲溶液用量的增加而迅速增强，达到一定值后基本趋于平衡。因此，本文选择其用量为1.0 mL 。 
　　2.4反应温度 
　　按实验方法，在同样条件下配制11份含锌离子的试液和空白溶液，控制不同温度进行反应，结果表明：反应开始随着温度的升高△F逐渐增大，当达到一定温度55℃以后△F有明显降低，故本实验选用55℃作为测量温度。 
　　2.5反应时间 
　　按实验方法，在不改变其他条件的情况下，研究了反应时间对体系荧光强度变化量△F的影响。实验结果发现，随着反应时间延长，空白溶液荧光强度基本不变，而试样溶液的荧光强度则有明显的上升，因此△F值有所增大，在15～20min反应时间内基本保持不变，本实验选用反应时间为15min。 
　　3.线性范围、精密度及检测限 
　　精确量取不同量锌离子的标准溶液，在所选择的最佳条件下，按照实验方法，配成一系列不同浓度的锌离子试液，分别测定其荧光强度并与空白对比，结果表明，锌离子量在0.7-158.0 μg/L范围内与荧光强度改变量△F呈良好的线性关系。其线性回归方程为：△F=9.1081+1.0363CZn2+ （μg/L） ，相关系数（r）为： 0.9992。按照实验方法，对Zn2+含量为100 μg/L的标准溶液进行11次平行测定，其相对标准偏差为1.98%。方法的检出限（3σ）为0.23 μg/L。 
　　4.共存离子的影响 
　　按实验方法考察了常见阳、阴离子对体系的干扰情况。结果表明，当锌离子浓度为100 μg/L，以相对荧光强度变化不超过±5%计，共存组分允许存在的最大倍量为：5000倍的Cl-，I -，Br-，K+，Na+，2000倍的NO3-，NH4+， Ac-，SO42-，SO32-；1000倍的F-，PO43-，HCO3-，CO32-；500 倍的Bi3-，Sn（Ⅳ），C2O42-，Cr（Ⅲ）；200倍的Ca2+，Fe2+，NO2-；100倍的Ag+，Hg2+，Co2+，CN-；20倍的Al3+，Mg2+，Cu2+。 
　　三、样品分析 
　　分别准确取适量所采集的河水和井水各两份， 每份1 L，在其中一份中加入一定量的锌标准溶液， 然后蒸发浓缩至50mL ， 加入4mL 硝酸，加热至冒白烟， 再加入4mL 浓硫酸， 蒸发近干， 取下冷却后， 用少量水溶解残渣， 转移到250mL容量瓶中， 加6mol/L氢氧化钠调至中性， 加水定容。移取适量以上试液于50mL容量瓶中， 按实验方法加入试剂， 测其荧光强度，同时对样品进行加标回收实验 ，结果见表1。 
　　表1 试样分析结果及回收率 n=8 ， μg/L 
　　参考文献 
　　[1]鲁绪会，刘照琴，刘炜，等. 催化动力学吸光光度法测定痕量锌 . 安康师专学报， 2000 ，12 （2） ：28-31. 
　　[2]高峰，李山，王伦. 铬黑T2H2O2 催化动力学光度法测定痕量锌. 安徽师范大学学报， 2001 ， 24 （ 2） ：158-160. 
　　[3]康信煌，邓春梅.2 ，4 - 二羟基苯甲醛缩甘氨酸的合成及荧光法测定粮食中痕量锌. 理化检验（化学分册） ，2004 ，40 （5） ：249 ～251. 
　　[4]唐波，江崇球，张晓钢，等. 钪-水杨醛苯甲酰腙高灵敏的荧光反应及其应用.分析化学， 1997 ， 25 （6） ： 683～685.